期和远处无转移生存期呈正相关(补充图3A-D)。同样，低表达HLF的ADC患者以及SQC患者(补充图3I-L)的局部无复发生存期和远处无转移生存期较差(补充图3E-H)。以上结果说明，低表达HLF促进NSCLC早期局部复发和多器官远处转移。

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　　?为了进一步确定HLF在NSCLC细胞局部肺定植和远处转移中的作用，首先在多个不同亚型的NSCLC细胞株中检测了HLF的表达。

　　?如补充图4A和B所示，与非癌永生化肺支气管上皮细胞BEAS-2B和正常肺成纤维细胞WI-38相比，NSCLC细胞中HLF的mRNA和蛋白质水平差异下调。我们进一步构建了HLF过表达的NCI-H1975(H1975)和NCI-H520(H520)肺癌细胞，这些细胞表达所有NSCLC细胞系中HLF水平最低，并内源性下调NCI-H460(H460)和NCI-H1299(H1299)细胞HLF的表达，这两种细胞均表达最高的内源性HLF水平(补充图4C和D）。

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　　?采用小鼠尾静脉模型研究NSCLC细胞的肺定植和生长能力。如图3A-D和补充图4E，上调HLF显著抑制H1975细胞在肺中的肿瘤发生，表现为肺结节的形成减少，每m㎡的癌细胞数量减少，累积生存率延长。相反，沉默HLF对H460细胞有相反的效果(图3A-C、E和补充图4E)。

　　?值得注意的是，HLF表达的改变不仅影响大肺结节的形成(在分析的肿瘤切片中定义为>50肿瘤细胞)(图3B)，但也影响小肺结节的形成(在分析的肿瘤切片中定义为5-50个肿瘤细胞)(补充图4E)，这支持了HLF在肿瘤细胞的早期定植和随后的肺内生长中都起着重要作用的观点。谷

　　?最后，与实验结束时相比，在注射HLF稳定过表达的H1975细胞和下调H460细胞的小鼠肿瘤组织中，进一步证实了相应的高和低表达水平(补充图4F)。

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　　?然后，采用体内左心室接种小鼠模型检测HLF对NSCLC远处转移能力的影响，将载体/NCI-H1975、HLF过表达NCI-H1975、载体/NCI-H460和HLFsh#1/NCI-H460细胞接种到小鼠左心室。

　　?接种细胞6周后，收集小鼠的胫骨、脑、肝组织，并进行H&E染色处理。如图所示。图3F-I和补充图4G，我们在与载体组相比，过HLF表达小鼠组中，包括骨、大脑和肝脏等远处器官检测到较少的转移性肿瘤，以及较长的累积存活期延长。

　　?相比之下，沉默HL

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